別添

る方法、あるいは、生きた菌体の中で菌の酵素により強い蛍光物質に代謝される化学物
質を菌に取り込ませ、生成した蛍光物質の有無を固相サイトメトリーによって検出する
方法がある。
いずれの試験法も数時間から８時間ほどで結果が得られることから、調製した特定細
胞加工物等の投与の可否を判断する試験として使用が可能とされている。ただし、NAT
やフローサイトメトリー法に適用できる被験用量には制限（表１）があり、表２に例示
したような十分な被験用量を用いた試験が適用できない可能性がある。この場合、適切
な検出感度を担保するための方策としては、1）大量の培養上清等から多数（大用量）
の被験検体を採取し、試験を実施する、2）被験検体を濃縮して試験を実施することな
どの対応が必要となる。対象とする被験物からどの程度の被験用量を採取するかという
ことと、標榜検出感度によってどれだけの目的検出感度で無菌性を確認できるかについ
ての関係の具体例は図２を参照すること。
被験物 100mL に含ま
れる微生物量

被験検体 1mL(被験用量)
に含まれる微生物量

標榜検出感度
2

10 「cfu

１mL を無菌試験用に採取
4

10 「cfu

3

10 「cfu

10「cfu

1「cfu

試験結果
2

10 「cfu

10「cfu

無菌試験

陽性

陽性

陽性

陰性

陽性

陽性

10 cfu

1「cfu

陰性

陰性

陽性

10「cfu

＜「1「cfu
a

陰性

陰性

陰性

2「

図２ 被験物の採取量（被験用量）
、標榜検出感度と試験結果の関係
上記（１）培養法や（２）直接法による迅速無菌試験法に関しては、高感度化を含め
て様々な試験法が開発されており、濃縮等による高感度化、検出手法の高感度化、アッ
セイの自動化や検出手法の迅速化など、様々な手法が提案されている。用いる特定細胞
加工物等の製造工程やその特徴に応じて、利用可能であることを評価することが重要で
あり、個別にバリデーションを求めるものではないが、特定細胞加工物等に適用した時
に、採用しようとする迅速無菌試験法が標榜検出感度や精度が担保できることを確認す
る必要がある。

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