別添

により短期間で判定が可能であるが、菌の特性（好気性菌か嫌気性菌か、至適培養温度、
培地成分、糖質の資化性）が異なるため、できるだけ多くの菌種を増幅可能な複数の条
件で培養することが重要となる。いずれにしても２～７日間の培養を行うことで直接法
より高感度な測定が可能である。ただし、特定細胞加工物等の出荷判定や投与の可否の
判断に用いるには時間的制限がある。このため、このような手法は、むしろ、製造工程
での無菌性を保証するための工程内管理試験として有用性がある。さらに基準書に従っ
た特定細胞加工物等の製造の妥当性を示すことにもなる（図１）
。

細胞採取（採血、骨髄採血、脂肪吸引等）
長期培養工程(2～3 週以上)
工程内管理試験
採
取
細
胞
の
無
菌
性
確
認

細胞加工物の回収

工程内管理試験

工程内管理試験により汚染の早期
検出、交差汚染リスクの低減化

培養工程(3～4 日程度)

解凍

凍結保存

細胞加工物の回収

工程内管理試験（凍結中）

培養工程(3～4 日程度)
細胞加工物の回収
最小限の加工工程（培養以外.細胞の純化等）

出
荷
判
定
試
験
・
投
与
判
断
目
的
の
試
験

出
荷
／
投
与

回収直後に投与する場合は
NAT などの迅速無菌試験法

採取

図１ 製法の違いに応じた無菌試験の適用（例）
一方、特定細胞加工物等を製造後、一定期間超低温で安定に保存し、必要に応じて解
凍後、患者に投与する場合には、その出荷判定や投与の可否を判断するための試験とし
て迅速無菌試験法（培養法）を用いることが可能である。ただし、細胞を解凍後、さら
に一定期間培養後に投与する場合には、出荷判定又は患者への投与可否を判断するため、
追加的に迅速無菌試験を行うことが求められる（図１）
。
（２）直接法
一方、直接法では、細菌や真菌に特異的なリボゾーマル RNA（rRNA）の遺伝子が種間
の保存性が高いことを利用し、これらの遺伝子の特定共通配列を PCR 等により増幅して
検出する NAT や、生きた菌体が産生する ATP を生物発光の原理を用いて高感度に検出す

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